产品货号:
KD0372
中文名称:
12.5%非变性PAGE凝胶制备试剂盒(7.5mm)
英文名称:
12.5% PAGE Gel Preparation Kit
产品规格:
125T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
保存:2~8℃
储存条件:2~8℃储存,有效期1年。
产品货号及品名(125T):
注:0.75mm厚mini胶可制125块;1.00mm厚胶可制90块;1.50mm厚胶可制60块。
产品组成:
注意:
1.过硫酸铵(APS)为结晶性粉末,2~8℃储存,使用前每支加入1mL蒸馏水即为10% APS溶液,现配现用最佳,溶液用后-20℃可储存2个月。APS如出现严重结块,即已变质。
2.本试剂盒制胶液无需添加TEMED。如需加快成胶,也可按1‰补加TEMED(本试剂盒不提供)。
3.本试剂盒只适用于常规蛋白(酸性蛋白)电泳,不适用于碱性蛋白。
产品简介:
Biorab出品的系列固定浓度非变性PAGE凝胶制备试剂盒,仅包含APS,5%浓缩胶制胶液,及单一浓度的分离胶制胶液三种试剂。APS为固体粉末形态,且为小包装多支,便于储存和配制;分离胶及浓缩胶制备仅需相应的制胶液与10% APS溶液按100:1混合,依次注入制胶模具成胶即可,无需自备试剂,尤其是无需添加TEMED,既安全环保,又便于快速制胶;浓缩胶制胶液内已加入红色染料,便于准确上样,且实验证明该染料对电泳及后续实验无不良影响。但请注意该系列制胶试剂盒只可用于单一分离胶浓度非变性PAGE胶的制备,请根据“产品货号及品名”选择相应货号产品。如需小量制备多种浓度分离胶请选购KD2076产品。
操作步骤(以0.75mm厚mini胶为例):
一、灌制分离胶
1.参照制胶模具说明,装配好模具。
2.取分离胶制胶液4mL,按1%加入40μL 10% APS溶液,吹打混匀,避免产生气泡。
3.注入模具(留少许以判断凝胶状态),通过抽真空或者吸水滤纸去除气泡,凝胶混合液加至距前玻璃板顶端约1.5cm或距梳齿0.5cm,轻轻加入1mL水覆盖封胶,使分离胶表面保持平整。
4.静置30~60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表明凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
1.倒掉分离胶上的水层。
2.取浓缩胶制胶液1mL,按1%加入10μL 10% APS溶液,吹打混匀,避免产生气泡
3.注入模具的分离胶的上面(留少许以判断凝胶状态),通过抽真空或者吸水滤纸去除气泡,至前玻璃板的顶端。
4.插入梳子,避免产生气泡。
5.静置30~60分钟,待上层凝胶聚合后,小心地拔出梳子,避免破坏加样孔。
6.进行常规电泳操作。使用Tris甘氨酸电泳液建议电泳条件:初始电压80V,约30分钟,样品进入分离胶后,电压调至120V,约1小时,样品抵达凝胶底部停止电泳。
注意事项:
1.APS溶液常温不稳定,取用后立即放回-20℃冰箱;若发现凝胶时间延长,应更换APS溶液。
2.PAGE凝胶的凝聚速度受温度影响,室温较低时,可以增加50%~100%的APS使用量。
3.在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
4.在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不能太快。
5.丙烯酰胺具有神经毒性,操作时请穿戴实验服和一次性手套。
附表1.PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围:
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